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尊龙凯时TWIST转录因子ELISA试剂盒说明书

发布时间:2025-03-11   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒专为科学研究而设计,不应用于医学诊断。以下是关于Twist转录因子(TWIST)Elisa试剂盒的详细使用说明及检测原理。

尊龙凯时TWIST转录因子ELISA试剂盒说明书

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。首先,将标本、标准品以及HRP标记的检测抗体依次加入到已经包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育及 thorough洗涤后,使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB会转化为蓝色,并在酸性环境中进一步变为最终的黄色。颜色的强度与样品中adropin(AD)的含量成正比。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)以计算样品的浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下:

1. 胶血清:使用不含热原和内毒素的试管,确保操作过程中避免细胞刺激。采集血液后,3000转离心10分钟以迅速小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量的生理盐水混合捣碎,3000转离心10分钟后取上清。

5. 保存:若样本未能及时检测,请按单次用量分装并存放于-20℃,以避免反复冻融。样品解冻时应在室温下进行,并确保样品充分均匀解冻。

在操作注意事项方面,您应自备必要的物品。此外,本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备:将20×洗涤缓冲液按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中。

洗板方法和操作步骤至关重要,绘制标准曲线时,可以在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,描绘出标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。

值得指出的是,试剂盒的性能不保证在所有情况下均有效,具体使用效果可能因实验设计而异。对于希望深入了解生物医疗领域的用户,尊龙凯时提供高质量的试剂盒及支持服务,确保您在研究中获得可靠的结果。