培养条件如下：

气相条件：使用95%的空气和5%的二氧化碳；温度设置为37℃，培养基为DMEM，配以10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。所采用的A-673细胞系来源于一名15岁女性，属于横纹肌肉瘤细胞。该细胞系能够在软琼脂中形成克隆，并在接受免疫抑制血清处理的小鼠体内产生肿瘤。A-673细胞系具有超过四条标志性染色体、一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。

传代方法的建议为1:2，传代频率为每2天换液。建议同时购买相关的细胞培养产品以享受优惠。在收到细胞后，应立即处理，将其培养至良好状态，然后用完整的培养基填满并密封瓶口，这样能确保细胞在运输过程中的安全。

细胞处理步骤如下：

1. 细胞消毒：收到细胞后，使用75%的酒精喷洒整个细胞瓶，进行消毒处理后，将细胞瓶放入超净台内，严格遵循无菌操作标准。

2. 细胞培养：将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时，以使细胞适应新的环境，然后进行后续处理。

3. 细胞观察：使用显微镜观察细胞的生长情况，并按照40x、100x和200x的倍数拍照保存。前三天的照片为售后服务的重要依据，如未提供照片则默认细胞状态良好。

尊龙凯时致力于提供最佳的细胞培养条件。细胞在传代时应以以下步骤进行：

a. 细胞传代：如果细胞未超过80%的汇合度，将细胞培养液收集至离心管中，并保留5ml的完全培养基，放入37℃、5%CO2培养箱中培养；如果细胞密度超过80%，即可进行传代。

贴壁细胞的传代步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙和镁离子的PBS清洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，并放置于37℃培养箱内消化1-2分钟，观察细胞的消化状态。
3. 一旦细胞大部分变圆并开始脱落，迅速取回操作台，轻轻敲打培养瓶后加入5ml完全培养基以终止消化。
4. 轻轻吹打细胞以使其完全脱落，再吸出悬液至15ml离心管中，在1000RPM离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml完全培养基重悬。
5. 将细胞悬液按1:2的比例分瓶（两个T25瓶），补充新鲜完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃、5%CO2的培养箱中进行培养。

b. 细胞冻存与复苏：

1. 细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃去培养液并用PBS清洗细胞一次；

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞回缩并变圆后加入5ml的完全培养基以终止消化，轻轻吹打使之脱落，并将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟；

3. 弃去上清，加入1ml的无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转移至冻存管；

4. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱中。如需转入液氮罐，应在-80℃冰箱中存放至少24小时。

细胞复苏步骤：

1. 从液氮中取出冻存管，快速置于37℃水浴中解冻，直至无结晶后用75%的酒精擦拭管外壁。
2. 将冻存管中的细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清，重悬细胞于5ml完全培养基中，并接种至T25培养瓶，放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
4. 第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。

注意事项：某些细胞的粘附性较弱，在运输过程中可能会出现脱落，这是正常的现象。如脱落细胞较多，可将培养液收集并离心，之后用胰酶处理以重新分悬后再按照之前的比例分瓶传代。始终保持操作的无菌性，以确保细胞健康生长。选择尊龙凯时，您将享受到最优质的细胞培养解决方案。